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2022
11-29都說“實驗虐我千百遍,我待實驗如初戀”,咱科研er早就看淡失敗了,甚至還能從失敗中吸取點小經(jīng)驗優(yōu)化下小方案。但是!因為污染而導(dǎo)致的實驗失敗,就太讓人頭疼了,浪費樣本浪費時間精力,甚至還影響健康,屬實是百害而無一利。這么多污染防不勝防怎么辦?別怕,Bioss實驗室污染清除全套試劑,讓污染無處遁形。1支原體污染支原體污染是細胞培養(yǎng)過程中較常見污染之一,保守估計常規(guī)細胞培養(yǎng)中有15–35%存在支原體污染。支原體生長緩慢,不會馬上使細胞死亡,但會影響細胞內(nèi)的各種參數(shù),例如部分支原體會...
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11-29背景資料β2微球蛋白(β2Microglobulin,β2-MG)由99個氨基酸組成的內(nèi)源性低分子量血清蛋白,分子質(zhì)量為11.8kDa,由淋巴細胞、血小板、多形核白細胞產(chǎn)生。β2-MG是人類白細胞抗原(HLA)Ⅰ類的β鏈(輕鏈),含有鏈內(nèi)二硫鍵的單個多肽鏈。β2-MG廣泛存在于血漿、尿液、腦脊液、淋巴細胞及血小板等表面,量極微。正常人中,β2-MG以相對恒定的速度合成,并被釋放到體液內(nèi),血清β2-MG極易通過腎小球濾過膜,濾過的β2-MG幾乎被腎近曲小管細胞重吸收和降解,不會...
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11-29背景資料催乳素(Prolactin,PRL)又叫泌乳素、促乳素,是一種由垂體前葉合成并分泌的多肽類激素,由199個氨基酸殘基組成。PRL在體內(nèi)有多種分子質(zhì)量的存在形式,最常見的為22kDa,還有16kDa等,不同形式的催乳素與不同PRLR(催乳素受體)結(jié)合。PRL的主要作用為促進機體乳腺上皮細胞的增值和分化,促進乳汁合成。一般情況下,健康成年人的血PRL低于25ng/mL,且大多數(shù)會更低,低于20ng/mL。催乳素的分泌受下丘腦的催乳素釋放因子(促甲狀腺激素釋放激素、血管緊張...
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11-29背景資料鐵蛋白(Ferritin,F(xiàn)ER)是機體內(nèi)貯存鐵和維持細胞鐵平衡的一種可溶組織蛋白。鐵蛋白由蛋白質(zhì)外殼(去鐵蛋白)和鐵核心組成,去鐵蛋白一般為外徑約12nm,空囊腔徑長約8nm的球形籠狀結(jié)構(gòu)。去鐵蛋白通常由24個亞基組成,每個單位包括兩種亞基:H亞基(重鏈,主要在心臟)和L亞基(輕鏈,主要在肝臟),其中H型亞基(FerritinHeavyChain,F(xiàn)HL)分子量為22kDa,與中和游離鐵及抗炎有關(guān);L型亞基(FerritinLightChain,F(xiàn)TL)分子量為19...
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11-26生物鏈霉親和素是與親和素(avidin下稱AV)有相似生物學(xué)特性的一種蛋白質(zhì),是streptomycesavidinii菌的分泌物,其分子量及結(jié)合生物素的能力與雞蛋清中的親和素相似,等電點6.0,非特異性結(jié)合遠比親和素低。生物鏈霉親和素是四聚體蛋白,大小為66KDa。一分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素結(jié)合,兩者之間的親和力極為強烈,鏈霉親和素-生物素復(fù)合物的解離常數(shù)處于10mol/L數(shù)量級,這一性質(zhì)常用于分子生物學(xué)用途。其中一條完整的SA肽鏈中有159個氨基酸殘基...
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11-23His標(biāo)簽抗體是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設(shè)計用于重組蛋白質(zhì)的吸附純化。由于分子量較小,并且較容易分離和純化,His-tag融合標(biāo)簽與其他標(biāo)簽相比有很多明顯優(yōu)勢,是目前用于純化的融合標(biāo)簽中使用最為廣泛的一種。His抗體可以用于檢測和His標(biāo)簽融合表達蛋白的表達、細胞內(nèi)定位,以及純化、定性或定量檢測His融合表達蛋白等。然而,目前商品化His-tag的單克隆抗體(mAb)種類不多,且價格也十分昂貴。如何選擇合適的His標(biāo)簽抗體...
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11-17某些熒光物質(zhì)在一定條件下,羊源性成分核酸檢測PCR-熒光探針試劑盒既能與抗原或抗體結(jié)合。又不影響抗原與抗體的特異性結(jié)合。用熒光抗原或熒光抗體對待檢標(biāo)本染色后,在熒光顯微鏡下觀察,可看到發(fā)出熒光的抗原抗體復(fù)合物。作為蛋白質(zhì)標(biāo)記用的熒光物質(zhì)需具備如下條件:①有與蛋白質(zhì)分子形成穩(wěn)定共價鍵的化學(xué)基團,但不形成有害產(chǎn)物;②熒光效率高,與蛋白質(zhì)結(jié)合的需要量少;③結(jié)合物在一般條件下穩(wěn)定,結(jié)合后又不影響免疫活性;④作為組織學(xué)標(biāo)記,結(jié)合物的熒光必須與組織的自發(fā)熒光有良好的反襯;⑤結(jié)合程序簡單,...
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11-12熒光抗體操作過程為何要避光?(1)生物化學(xué)反應(yīng)需要酶的催化作用,所以熒光素在熒光素酶和ATP等物質(zhì)的參與下可進行反應(yīng)發(fā)出熒光.ATP是生命活動能量的直接來源,發(fā)光強度與ATP的含量成正比,所以根據(jù)發(fā)光強度可以計算出生物組織中ATP的含量。(2)影響酶活性的外界因素有溫度和pH,其中維持溶液pH的相對穩(wěn)定時常常使用緩沖液.分光光度計反應(yīng)室內(nèi)發(fā)生的能量轉(zhuǎn)換是ATP中活躍的化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能。(3)熒光素酶濃度不同,但發(fā)光強度相同,由于受ATP數(shù)量限制,發(fā)光強度也不再增加。(4)每個...
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